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倒置显微镜和其他光学显微镜的区别

文章出处:自创 责任编辑:中特精密-LHB 发表时间:2025-06-10
  

​倒置显微镜(Inverted Microscope与其他常见光学显微镜(如正置显微镜、体视显微镜、荧光显微镜等)在结构、应用场景和工作原理上存在显著差异。以下是详细对比:

 

1. 核心区别:光路与样品放置方式

类型

光路设计

样品放置

物镜位置

聚光镜位置

倒置显微镜

物镜在样品下方,光源在上方

样品从顶部放入(培养皿/培养瓶)

下方

上方(长工作距离)

正置显微镜

物镜在样品上方,光源在下方

样品从顶部放入(载玻片)

上方

下方

体视显微镜

平行光路,双目观察

样品从侧面或顶部放入

侧方或上方

通常无聚光镜

 

 2. 核心功能差异

 1倒置显微镜的特点

- 适用样品:  

  - 活细胞培养(培养皿、培养瓶)、厚组织切片、液态样品(如血细胞悬液)。  

  - 无需切片:可直接观察容器底部的细胞或颗粒。  

- 优势:  

  - 长工作距离物镜:避免物镜触碰培养器皿(如Petri dish)。  

  - 兼容培养环境:可配合恒温CO₂培养箱进行活细胞长时间观测。  

  - 底部成像:适合观察贴壁细胞的底部形态(如细胞迁移、粘附)。  

- 典型应用:  

  - 细胞生物学(如细胞分裂、凋亡)、微生物培养、 IVF(试管婴儿技术)。  

 

 2正置显微镜的特点

- 适用样品:  

  - 固定切片(如病理切片、植物切片)、已封片的微小样品(如细菌涂片)。  

- 优势:  

  - 高分辨率:物镜NA值更高(如100×油镜),适合观察亚细胞结构。  

  - 成本较低:常规型号比倒置显微镜便宜。  

- 局限:  

  - 无法直接观察培养皿中的活细胞(需转移至载玻片)。  

 

 3体视显微镜(Stereo Microscope

- 适用样品:  

  - 大体积或不透明样品(如昆虫、电路板、矿石)。  

- 优势:  

  - 三维立体成像:低放大倍数(通常5×~100×),景深大。  

  - 操作空间大:适合显微操作(如解剖、焊接)。  

 

2. 扩展对比(其他光学显微镜)

类型

核心用途

与倒置显微镜的区别

荧光显微镜

特异性标记成像(如GFP蛋白)

倒置+荧光模块=倒置荧光显微镜(专用于活细胞荧光)

共聚焦显微镜

高分辨率三维成像

倒置设计更常见(适合厚样品Z轴扫描)

相差显微镜

增强透明样品对比度

倒置相差显微镜常用于无染色的活细胞观察

 

 4. 如何选择?

- 倒置显微镜:  

  - 需要观察活细胞、培养液中的微生物或厚组织。  

  - 实验涉及长时间动态记录(如细胞周期追踪)。  

- 选正置显微镜:  

  - 检测固定切片、染色样品或需要超高分辨率(如油镜观察细菌)。  

- 选体视显微镜:  

  - 操作宏观样品(如解剖、工业检测)。  

 

 5. 注意事项

- 倒置显微镜的局限性:  

  - 物镜NA值通常较低(受培养皿厚度限制),分辨率可能不如正置显微镜。  

  - 对培养器皿的底部平整度要求高(如玻璃底培养皿)。  

- 正置显微镜的局限性:  

  - 无法直接观察培养容器中的样品,需制样,可能影响活细胞状态。  

 

 总结

倒置显微镜的核心优势在于活细胞观察和无损检测,而正置显微镜更适合高分辨率的固定样品分析。根据实验需求(如样品类型、动态或静态观测)选择,也可组合使用(如倒置荧光显微镜+共聚焦模块)。

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