722S型分光光度计是一种可见光区分光光度计,主要用于实验室中对液体或透明固体样品进行吸光度(A)或透光率(T%)测量,从而进行定量分析、浓度测定或化学反应动力学研究。
1. 主要用途
(1) 定量分析(最常用)
- 测定溶液中特定成分的浓度,如:
- 蛋白质浓度(如用Bradford法、BCA法)
- 核酸浓度(DNA/RNA在260 nm处的吸光度)
- 酶活性测定(如过氧化物酶、碱性磷酸酶)
- 化学物质含量(如葡萄糖、重金属离子、亚硝酸盐等)
(2) 定性分析
- 通过扫描样品的吸收光谱(不同波长下的吸光度),辅助判断物质的种类或纯度(如色素、染料、某些金属配合物)。
(3) 化学反应监测
- 实时监测化学反应的吸光度变化,研究反应速率(如酶促反应、氧化还原反应)。
2. 工作原理
1. 光源(钨灯)发出白光,经单色器(光栅)分离出特定波长的光(如540 nm)。
2. 光通过样品溶液,部分被吸收,剩余光被光电检测器接收并转换为电信号。
3. 仪器计算吸光度(A)或透光率(T%),并与标准曲线对比,得出样品浓度。
3. 722S型的特点
- 波长范围:通常 340~1000 nm(覆盖可见光区,部分型号可扩展至近红外)。
- 数字显示:直接读取吸光度(A)或透光率(T%),比老式指针式(如721型)更精准。
- 光栅分光:比棱镜分光的波长精度更高。
- 操作简单:适合常规实验室,但不能测紫外光区(如需紫外检测,需用752型等紫外-可见分光光度计)。
4. 典型应用案例
应用领域 | 检测项目 | 常用波长(nm) |
生物化学 | 蛋白质(Bradford法) | 595 |
分子生物学 | DNA/RNA浓度 | 260 |
环境检测 | 水中亚硝酸盐 | 540 |
食品分析 | 糖含量(蒽酮法) | 620 |
工业质检 | 染料浓度 | 根据染料最大吸收峰 |
5. 使用注意事项
✅ 调零(空白校正):用空白溶液(如蒸馏水)调100%透光率(或0吸光度)。
✅ 比色皿选择:
- 玻璃比色皿:适用于可见光区(340~1000 nm)。
- 石英比色皿:如需紫外检测(<340 nm),但722S一般不支持。
✅ 样品浓度适中:吸光度最好在 0.2~0.8 之间(超出范围需稀释)。
✅ 避免气泡或污渍:比色皿外壁需干净,否则影响光路。
5. 722S vs. 其他型号
型号 | 波长范围 | 分光方式 | 适用场景 |
721型 | 360~800 nm | 棱镜分光 | 老式指针式,精度较低 |
340~1000 nm | 光栅分光 | 数字显示,常规实验室 | |
752型 | 200~1000 nm | 光栅分光 | 紫外-可见光,功能更强 |
总结
722S型分光光度计主要用于可见光区的吸光度测量,适用于生化实验、环境监测、食品分析等领域的浓度测定。它的优点是操作简单、价格较低,但不能测紫外光区。如需更高级功能(如紫外检测、自动扫描),需选择752型等紫外-可见分光光度计。